1. 电泳中,只要在恒压的条件下电泳时期蛋白质才可以保持恒定的迁移速率。
2. 电泳时出现不规则的迁移条带的缘由多是电流不波动。因此,要确保上下电泳槽中的电泳液与凝胶保持良好的接触。其他可能的缘由包括:加样孔中加入的样品太多;样品中盐浓度太高;边缘效应。在凝胶边缘,迁移条带出现“浅笑”状或样品迁移速度减慢,可能是由于凝胶的两头比两侧更热形成的,降低电压有助于改善这种状况。
3. 染色和脱色普通用最短的工夫已足够。假如染色过夜,则需求更长的工夫脱色。假如脱色后发现染色不彻底,还可以重新染色。
4. 非特异性的考马斯亮蓝染色次要是由于未溶解的染料堆积而成,应将染料溶液过滤后运用。
5. 样品缓冲液中煮沸的样品可以在-20℃保存数周,但是反复冻融会导致蛋白质降解。储存在-20℃的样品上样前,应该先使样品升温至室温,使得SDS沉淀溶解。
6. 样品不能沉到加样孔底部的缘由是:sample loading buffer中没有足够量的甘油;或梳子安放不合适,使得加样孔底部留有聚合的丙烯酰胺。
7. 制样过程中,假如样品混合物变为黄色,阐明溶液太酸,应加入NaOH调至蓝色,否则样品在电泳时会出现反常迁移。
8. 假如在4℃进行电泳,可以用十二烷基硫酸锂(LiDS)替代SDS,低温下LiDS不会沉淀。
9. 蛋白质条带的明晰与否取决于SDS的级别和品牌。
10. 丙烯酰胺有剧毒,可导致中枢神经麻痹,也可能有致癌或致畸变的作用。可被正常皮肤吸收。假如接触了丙烯酰胺粉末或溶液相,应立即用肥皂水冲洗。未聚合的丙烯酰胺应加入过量催化剂,以固体方式处理。